【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：大鼠雌二醇（E2）定量檢測試劑盒（ELISA）

英文名稱：Rat Estradiol（E2）ELISA KIT

【包裝規(guī)格】

96人份/盒

【預期用途】

僅供科研使用，定量檢測血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液中大鼠雌二醇（E2）的濃度。

【檢驗原理】

采用酶聯(lián)免疫競爭法檢測血清中雌二醇含量。首先用羊抗兔包被微孔板，制成固相二抗，然后加入待測血清、辣根過氧化物酶標記雌二醇以及抗雌二醇抗體，使之形成包被二抗-抗雌二醇抗體-雌二醇（HRP）復合物，標記雌二醇的結合量與血清中的雌二醇量成反比。經(jīng)顯色后在酶標儀測定吸光值(OD值)，通過計算機或作圖擬合濃度－吸光度曲線，反算出待測血清中雌二醇含量。

【檢驗方法】

操作程序

1. 將各種試劑移至室溫平衡1小時，取濃縮洗滌液，根據(jù)當批檢測數(shù)量，用蒸餾水1：20稀釋，混勻后備用。

2. 將預包被板從密封袋中取出，設一個空白對照孔，不加任何液體；每個校準品依次各設兩3. 孔，每孔加入相應校準品50μl；其余每個檢測孔直接加質控品或待測血清50μl。

4. 每孔加入酶標抗原50μl（空白對照孔除外），再按同樣的順序每孔加入抗體50μl，充分混勻，貼上封板膜，置37℃溫育1小時。

5. 手工洗板：棄去孔內液體，洗滌液注滿各孔，靜置10秒甩干，重復3次后拍干。洗板機洗板：選擇洗滌3次程序洗板后拍干。

6. 每孔加顯色劑A液50μl，顯色劑B液50μl，振蕩混勻后，置37℃避光顯色15分鐘，每孔加終止液50μl。

7.用酶標儀讀數(shù)，單波長酶標儀需先用空白對照孔調零點，然后測定各孔吸光值。

【產(chǎn)品性能指標】

1、外觀和物理檢查：液體組分應澄清，無沉淀或絮狀物；所有組分應無包裝破損。各組分裝量不少于表1中要求。

2、準確性：在大鼠血清中添加高、中、低三個濃度的雌二醇制成樣品，以試劑盒校準品進行分析測定，用百分結合率對數(shù)（logit-ln）擬合，要求回收率在85.0%～115.0%之間。

3、線性：用Logit-ln數(shù)學模型擬合，在40~1000pg/ml范圍內，劑量-反應曲線相關系數(shù)（r）的絕對值應不低于0.9900。

4、精密度：

4.1批內精密度（CV%）應不高于15.0%；

4.2批間精密度（CV%）應不高于15.0%。

5、最低檢出限：試劑盒最低檢出限應不大于10 pg/ml。

6、質控血清測定值：每次檢測結果均應在允許范圍之內。

7、穩(wěn)定性

2℃-8℃保存，有效期6個月。

8、檢測范圍

10pg/mL-1400pg/ml

【注意事項】

生物安全

1、檢測必須符合實驗室管理規(guī)范的規(guī)定，嚴格防止交叉污染，所有樣品、洗棄液和各種廢棄物都應按照傳染物進行處置。

2、試劑盒的液體組分中，含有proclin-300防腐劑，可能引起皮膚過敏反應，避免吸入煙霧與皮膚接觸。

3、底物液對皮膚、眼睛和上呼吸道有刺激作用，避免吸入煙霧。戴上防護手套，實驗完成后徹底洗手。